
家禽抗体监测血清样品的采集与保存
高致病性禽流感(HPAI)是由a型禽流感病毒(AIV)引起的一种严重的家禽传染病。从2005年起,融安县开始实施家禽高致病性禽流感强制免疫。为及时了解家禽疫苗免疫质量,评价免疫抗体水平,近年来在该县家禽养殖场开展了定期抽样,为科学防疫提供依据。免疫抗体水平的监测依赖于血清学检测。血清样本采集是否符合要求,直接影响检测结果的正确性和免疫效果的评价(血清采集)工具及主要材料
免疫家禽、75%酒精棉球、干棉球、采血器、小型塑料离心管、无菌手套。消毒剂、记号笔、取样登记表、易封样袋、签字笔、保温取样盒、塑料包装袋等(
2.采集方法及步骤
2.1鸡
的采血方法主要采用翼下静脉采血法。先将鸡侧卧在保定,露出腋窝,去掉羽毛,看到翼下静脉。按压翼下静脉近端,使血管舒展。用75%酒精擦拭静脉皮肤,然后擦干酒精我用一个干棉球。右手拿着针的采血器。针口朝上,从翼根向翼方向沿静脉平行插入。血液回流后,抽出血液,采集3-4毫升血液。采血后用干棉球压迫止血。血液留在采血器内,采血器活塞向后拉,留有一定的空间,针头上盖有针帽。用记号笔将数字写在采血器上,倾斜采血器。采集的血样应保存一段时间,直至完全凝固后才能带走。强osci途中严禁乱跳,以免溶血。用签字笔逐项填写抽样清单内容。取样单上的编号应与样品编号一致,并随样品一起送至实验室。不同的血样不能混合(
2.2鸭的采血方法
2.2.1翼下静脉采血方法鸭的采血方法与鸡的采血方法相同(
2.2.2当鸭太小,翅膀不够大,不能使用时,可采用此方法翼下静脉采血。在保定,先把鸭子侧卧,抓住鸭腿,把上面的跗骨合上脚趾上方有一条小腿静脉。助手用手按压小腿静脉近端使血管扩张,用75%酒精消毒静脉处皮肤,再用棉球擦干。采血者用左手抓住鸭腿,用右手握住采血者。针口朝上,沿静脉从腿部到大腿平行穿刺。血液回流后,提取血液,采集约3ml血液。采血后,用干棉球压迫止血。血样的处理和填样方法与鸡(
2.3)相同血清沉淀、采集和保存
血样采集12小时后一般可沉淀血清,不够清晰的血清可在心脏分离2-3分钟后以2000转/分沉淀。将分离出的血清倒入小塑料离心管中,用记号笔在离心管上写上与血样相同的编号。将血清样品放入易封袋中,用记号笔在袋上注明取样地点、样品名称、样品编号、取样日期等。如果在24小时内检测到血清样本,则应在4小时内将其储存在冰箱中℃. 如果暂时不处理,应该反复冻融。如果血清样本需要在24小时内送到实验室的,用冰袋在培养箱中冷藏运输;如果超过24小时,应先冷藏,然后在培养箱中用大量冰袋运输。途中不超过48小时(
3.采血过程中出现的问题
3.1采血后无血清或凝胶样物质
,采血者没有空间。血清不易沉淀。家禽在24小时内饮水过少,血清不易沉淀。当血样静止不到12小时,或室内温度过低时。也可引起血清不易沉淀(
3.2 he在短时间内采集钼溶酶
血样,并在没有完全凝固的情况下取出。采血针不干净,站立过程中反复摇动血样或取血样时强烈震动。采血过程中,如果采血速度过快或采血器活塞被反复拉扯,红细胞就会分解,引起溶血。
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